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原代細胞復蘇技術

細胞的復蘇過程:
1)從液氮罐中取出細胞;
2)管蓋擰松1/4,10 s,釋放出可能存在管中的液氮,然后擰緊管蓋;
3)將該管放在37°C水中,小心轉動,使其內容物溶解;復蘇細胞時,注意勿使水進入凍存管內;
4)立即將管從水中取出,擦干,放置在無菌環境;
5)用70%乙醇擦干;
6)擰開管蓋,注意不要讓手指碰到管口螺旋處,用1 ml的移液槍,吸出管內液體;
7)將細胞鋪在包被多聚賴氨酸的培養皿上。細胞密度為:5000細胞/cm2 ;
8)蓋上管帽,放回原處,小心的搖培養皿,使細胞分布均勻;
9)將培養皿放入培養箱(37°C, 5% CO2 /95% air);
10)6-16小時更換培養基,除去剩余的DMSO和沒有吸附的死細胞。

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