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luminex多因子檢測樣本收集方法

ProcartaPlex?多因子免疫檢測用于 Luminex® 平臺,以更少量的樣本完成對更多生物標志物的分析。使實驗者可以在25-50μL的樣本(血漿、血清、細胞培養上清液以及其他體液)。實現在25-50μL的樣本中同時對多達50種因子進行檢測與定量。該技術在多通道“類ELISA”分析中,為每種靶標使用了經不同染色處理的捕獲微球。相比于傳統的ELISA而言,ProcartaPlex免疫分析可以在使用樣本量少而時間相同的情況下,分析多達50倍數量的因子。ProcartaPlex多通道免疫分析提供了多種試劑盒類型,涵蓋六個物種(人類、小鼠、大鼠、非人靈長類、豬以及犬類),從而滿足實驗者的研究需求。

正確的樣本收集整理方法,是實驗成功至關重要的步驟. 目前ProcartaPlex可以檢測樣本類型有: 細胞上清、血清、血漿. 盡管其他生物學樣本沒有經過驗證,但是理論上也可以檢測,這些樣本包括: BAL, 唾液,CSF, 組織勻漿液和尿液。

下面我們針對幾種常見樣本的收集、保存方法:
1、血清
全血室溫(20-25 °C)凝固20-30min;
室溫1,000 x g 10min;
收集上清,或者選擇使用血清分離器;
可選:如果樣本是高血脂樣本,請先在2-8°10,000 x g 離心 10min,分離出下層血清;
多因子檢測血清樣本要求新鮮;如果不能在24h內檢測,需要分裝在-20 ℃以下,避免反復凍融。
2、血漿
根據要求選擇檸檬酸或EDTA作為抗凝劑。如果選擇肝素作為抗凝劑,建議每毫升血不超過10IU肝素(肝素用量過高,可能會導致部分檢測指標值偏高)。
收集抗凝全血后30min內,在4oC 下10,000 x g離心10min,分離收集血漿;
可選:可選:如果樣本是高血脂樣本,請先在2-8°10,000 x g 離心 10min,分離出下層血漿;
多因子檢測血漿樣本要求新鮮;如果不能在24h內檢測,需要分裝在-20 ℃以下,避免反復凍融。
3、細胞培養上清
檢測分泌性的成份時,最好用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
4、組織樣本
如果可以,請按照參考文獻推薦的方法。標本取完后液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的含有蛋白酶抑制劑的緩沖液, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。
保存過程中如果有沉淀,檢測前樣本應該再次離心去除沉淀,建議16,000 x g 離心5min。

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